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如何进行细菌浓度的测定

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如何进行细菌浓度的测定

进行细菌浓度的测定的方法有:

1、取已经培养好的细菌琼脂平板,加入2ml新鲜的生理盐水,用L棒轻轻将菌落刮下,收集在1.5mlEP管中。

2、取10μl菌液涂布在载玻片上,干燥固定后进行格兰染色鉴定。

3、将EP管置于离心机,5000RPM离心5min。

4、弃上清,取1ml完全无抗1640培养基重悬细菌;取新的1.5mlEP管,加入950μl生理盐水,及50μl菌液,混匀(稀释20倍)。

5、在分光光度计上测定OD值:以生理盐水作为空白对照调零,测定稀释20倍的菌液的吸光度,若OD值在0.3-0.7的范围内,则按照1OD=1.0×109CFU/ml计算原始菌液浓度。若OD值大于0.7且小于1,则取原始菌液进行40倍稀释后测定吸光度值。若OD值小于0.3,则取原始菌液进行10倍或5倍稀释后测定吸光度值。务必将OD值调整到0.3-0.7的范围内。

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