1、用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种（保留种，并用于生产的母种即为生产母种），可用于扩接原种。
2、综合马铃薯培养基。先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分钟，用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，琼脂溶化后，再加入其它配方中的药品。
3、灭菌。将分装后的试管扎捆好，放入高压蒸气灭菌锅，在1公斤每厘米压力下灭菌20分钟，使微生物包括芽子色全部杀死。待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面。
4、接种、培养。通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28摄氏度、3天后将温度降至24摄氏度继续培养，12—15天左右，菌丝长满整个试管斜面，即成(生产)母种。